Что такое терминация. Терминация — это заключительный этап репликации ДНК

Привет, друзья... Продолжая предыдущий пост, я хотел бы осветить тему «Терминации в МЛМ». Что это вообще такое?? Какие существуют условия терминации??? Правила и законы???

Потому как каждый воспринимает это по-своему и бывает допускает ошибки, очень важно рассмотреть со всех сторон (плюсы и минусы)... Особенно для людей непонятна эта система, которая в некотором роде похожа на увольнение с работы... Но так ли это на самом деле??? Можно ли сравнить терминацию в бизнесе с увольнением с работы? Или это нечто совсем другое???

Терминация из бизнеса (МЛМ) - это потеря БИЗНЕС места в компании и соответственно денежных вознаграждений, потеря структуры и своей даунлайн линии (условия терминирования обычно обговариваются в начале при регистрации в компании)

Итак, для начала я спрошу Ваше личное мнение:

Необходимы ли в сетевой компании (фирме) условия терминирования???

Да, это дисциплина
Нет, слишком жестко
Лояльно нужно относится к дистрибьюторам...

Спасибо, что ответили... Напомню Вам, что собственный бизнес и работа совершенно разные понятия:

мышление предпринимателя и работника разные;
ответственность за предпринятые действия отличаются;
соответственно чеки (зарплата) разные;
свобода или зависимость;
распорядок дня в корне изменен и т.д.

Терминация из бизнеса - увольнение?

Поэтому давайте подумаем: можно ли сравнить терминацию из бизнеса с увольнением с работы??? Ответ однозначно НЕТ!!! uvol1Потому что:

человека НЕ принимали на работу, а предлагали бизнес;
нужно понимать что это ТВОЙ бизнес и только ты можешь решить - потеряешь его или нет;
с самого начала, когда заключается договор, обговариваются правила его выполнения - за невыполнение одной из сторон - разрыв деловых отношений и потеря прибыли - эта особенность больше всего отличает терминацию от увольнения, т.к. при подписании соглашения (оговариваются ВСЕ правила ведения бизнеса).

Условия терминации

Существуют разные условия (они оговорены в соглашении или договоре компании), вот только несколько из них:

систематическое невыполнение оговоренного компанией условия по активности (обычно покупка продукта). Активность у каждого бывает разной - в одних компаниях это минимум $40 в месяц, в других $1000 - $1500
переход лидера (всей структуры) в другую компанию
«переманивание» и т.д.

Очень ВАЖНО отметить, что все эти все условия оговаривались заранее...

Правила и законы

Сетевой маркетинг, а также сама система ведения бизнеса, в основном пришла к нам из США, поэтому тут я покажу некоторые законы и правила, которые регулируют условия терминирования, основываясь на штатовские правила:

письменное предупреждение дистрибьютора как минимум за месяц до терминации;
достаточный срок терминирования - невыполнение активности 6 месяцев (достаточно, чтобы определиться строить бизнес в этой компании или нет);
минимальный срок терминации - 3 месяца;
правила «жесткой» и «мягкой» терминации;
правила должны соблюдаться абсолютно для всех дистрибьюторов и быть одинаковы для всех и т.д.

Для чего необходима терминация в МЛМ???

дисциплина (пришли в бизнес, а не плюшками баловаться);
в некоторых маркетинг-планах «зависшее» или «белое» место срывает чеки дистрибьютора;
построение структур на качество, а не на количество (остаются только те, кто будет расти как предприниматель)...

Вот, в принципе и все, что хотел я осветить... Жду Ваших мыслей в комментариях...

GSM терминация - современное направление телекоммуникационного бизнеса, которое доступно каждому. Начальный капитал, необходимый для запуска стартапа - минимальный, при этом вложенные деньги окупятся очень быстро. И вот, вы решили вложить средства в этот вид бизнеса. С чего же начать?

Для новичков в области VoIP GSM терминации мы подготовили полезный список. В нем мы перечисляем первые шаги начинающего терминатора, которые необходимы для успешного старта бизнеса.

• Купить VoIP оборудование. Чтобы начать зарабатывать на приземлении трафика, вам сначала нужно приобрести специализированное оборудование. В первую очередь необходим GSM шлюз. Оптимальный вариант - оборудование GoIP, которое вы можете купить по самой выгодной цене. Для безопасной работы и удобного хранения большого количества SIM-карт вам также понадобится SIM-банк.
• Выбрать направление для приземления звонков. В половине случаев на прибыль терминатора в первую очередь влияет выбранное направление. Имеется в виду страна, в которой будет осуществляться конечная терминации звонков. В бизнесе на голосовой терминации в качестве направлений популярны государства Африки. Также прибыльными маршрутами считаются балканские, латиноамериканские и постсоветские страны. Во многих из этих странах высокий рейт (цена за минуту звонка, которую вам платит транзитный оператор). При низких расценках на локальную связь, вы сможете зарабатывать по максимуму. В то же время, в странах с высоким рейтом жестко работают системы антифрод, которые блокируют карточки при обнаружении терминации.
• Подготовить локацию для размещения шлюзов. Локацией может выступать арендованная квартира или киоск, где подключено электричество. Локаций может быть несколько - для размещения нескольких комплектов оборудования. Там вы будете размещать ваши GSM шлюзы. Выбирайте в качестве локации людное место, где постоянно осуществляются звонки по мобильному телефону. Например, в бизнес-центре, в районе вокзала или аэропорта, в торговом центре, густонаселенном спальном районе и т. д.
• Приобрести большое количество SIM-карт. Количество SIM-карт зависит от количества каналов, задействованных в работе. При этом на первое время нужно иметь "запас". Лучше заранее подготовить минимум по 10 SIM-карт для каждого канала. Для регулярной покупки большого количества SIM-карт вам понадобится постоянный "источник" стартовых пакетов. Вы можете заниматься покупкой самостоятельно, но это будет отнимать у вас много времени. Можно обратиться к дилерам, которые торгуют SIM-картами. Их можно найти в интернете - на тематических форумах или в социальных сетях. Покупайте SIM-карты небольшими партиями у разных дилеров.
• Подключить стабильный интернет. Чтобы исключить помехи при телефонных разговорах и свести к минимуму количество несостоявшихся звонков, важно подключить стабильный интернет. Минимальная скорость - 42 Кбит/с на один канал оборудования. Показатели пинга и потери пакетов трафика должны быть минимальными. Обратите внимание, что 3G интернет едва ли можно использовать при терминации звонков, поскольку такое интернет-соединение не является стабильным.
• Построить эффективную логику терминации. Ваши SIM-карты должны постоянно звонить, чтобы терминировать трафик. При этом важно, чтобы они звонили "правильно", то есть не вызывая подозрений у GSM операторов. Чтобы не попасть в поле зрения антифрод-систем, нужно построить определенную "логику" поведения SIM-карт, в соответствии с параметрами "человечности". Проще говоря, ваши карты должны "вести" себя так, как будто звонят настоящие люди, а не шлюзы. Важно обеспечить паузы между звонками, имитировать перемещение по городу, генерировать входящие звонки, выполнять USSD-запросы и пр. Кроме того, нужно учесть при этом особенности региона, где вы работаете. Сделать это самостоятельно невозможно, вам понадобится профессиональный софт, который разрабатывает компания GoAntiFraud.
• Найти транзитного оператора для получения трафика. Клиентом терминатора выступает компания-оригинатор. Она поставляет трафик (минуты) под конечную терминацию и платит владельцу шлюза определенную сумму за каждую минуту разговора. Найти транзитного оператора можно самостоятельно, но нет уверенности, что он окажется порядочным партнером Никто не предоставляет гарантий в этом бизнесе. Компания GoAntiFraud поможет вам найти надежного поставщика трафика. У нас есть проверенные партнеры, с которыми мы работаем уже много лет.

Всего 7 шагов - и у вас уже есть работающий бизнес, приносящий стабильный и солидный доход. Чтобы не проходить этот путь в одиночку - присоединяйтесь к числу клиентов GoAntiFraud. Мы поможем вам на каждом этапе старта бизнеса!

Терминация представляет собой завершение синтеза полипептидной цепи и освобождение ее от рибосомы (рисунок 3.4).

Сигналами окончание син­теза, являются стоп-кодоны (или терминирующие) на цепи мРНК (см. таблицу 3.1). У этих кодонов нет комплементарных антикодонов тРНК, поэтому при достижении их рибосомой синтез прекращается. В А-центр вме­сто аа-тРНК входят белковые факторы терминации RRF, RF 1 и RF 2 .

Под действием этих факторов в Р-центре гидролизуется связь тРНК-полипептид. Освобожденный полипептид диффундирует из рибосомы. Вслед за этим происходит диссоциация комиплекса мРНК-рибосома, а затем рибосома распадается на отдельные субъединицы (малую и большую). После связывания этих частиц с другой молекулой мРНК весь процесс биосинтеза вновь повторяется.

Схема всех стадий процесса трансляции (биосинтеза белка) приведена на рисунке 3.5. Показаны условия, необходимые для начала инициации, формирование инициирующего комплекса, протекание элонгации, транслокации, действие пептидилтрансферазы, и наконец терминации процесса.

Синтез белка - процесс, протекающий со значительной затратой энер­гии. На образование одной полипептидной связи порядка шести молекул макроэргов. Так, при активации аминокислот АТФ гидролизуется до

IF1, IF2, IF3 – факторы инициации, EF1, EF3 – факторы элонгации

Рисунок 3.5 – Основные этапы трансляции

АМФ, что эквивалентно затрате двух макроэргов, а инициация трансляции требует один макроэрг – ГТФ. В процессе элонгации затрачивается два макро­эрга ГТФ: один на доставку аминоацил-тРНК в А-центр рибосомы, а второй - на процесс транслокации. И, наконец, на терминацию требуется один макроэрг ГТФ.

После окончания биосинтеза полипептидной цепи начинается период посттрансляционных превращений полипептида. Эти модификации могут включать в себя: частичный протеолиз (расщепление), модификации аминокислот (карбоксилирование, фосфорилирование, гликозилирование, ацилирование и др.), формирование пространственной структуры белка, образование дисульфидных связей, присоединение простетических групп, образование олигомерных структур и т.д.

Ранее формирование пространственной структуры (фолдинг илисвертывание полипептида) считалось самопроизвольным процессом, в результате которого возникала активная форма белка, энергетически более выгодная и стабильная, нежели хаотичный клубок полипептида. Последние исследования в области молекулярной биологии показали, что пространственная структура белка формируется при участии специальных белков – шаперонов (или белков теплового шока) – белковых комплексов, которые предупреждают неправильное сворачивание полипептида при выходе его из рибосомы и формируют нативную конформацию белка. Механизм сворачивания основан на способности шаперонов изменять кинетику межмолекулярных взаимодействий аминокислотных остатков, причем пространственная структура в конечном итоге будет все-таки опредляться аминокислотной последовательностью белка. Связывание шаперонов с фрагментами полипептидной цепи стабилизирует частично свернутую молекулу до того момента, пока не произойдет правильное пространственное сворачивание белка.

Регуляция синтеза белка. Регуляция синтеза белка очень сложный процесс, поскольку транскрипция и трансляция происходят в разных компартментах и обес­печиваются большим количеством соответствующих структур.

На уровне транскрипции регуляторные механизмы у прокариот и эукари­от имеют ряд общих черт, а именно регуляция по механизму индукции и репрессии.

Регуляция по механизму индукции (на примере лактозного оперона). В отсутствие индуктора (лактозы) белок-репрессор связан с оператором. Поскольку участки оператора и промотора перекрываются, присоединение репрессора к оператору препятствует связыванию ДНК-полимеразы с промотором и транскрипция структурных генов оперона не идет. Когда индуктор (лактоза) появляется в среде, то присоединяется к белку репрессору, изменяя его конформацию и снижая сродство к оператору. РНК-полимераза связывается с промотором и траскрибирует структурные гены. В результате синтезируются ферменты, принимающие участие в утилизации лактозы (молочного сахара) (рисунок 3.6).

Регуляция по механизму репрессии. При регуляции оперона по механизму репрессии белок-репрессор не имеет сродства к оператору. Когда к белку-репрессору присоединится молекула-корепрессор (например, конечный продукт метаболического пути), то в результате конформационных изменений белка комплекс белок-репрессор-корепрессор приобретает сродство к оператору и прекращает транскрипцию (рисунок 3.7).

В клетках высших организмов существует два типа регуляции путем индукции и репрессии – кратковременная и длительная. С помощью первой, регулируется содержание белков в клетках в условиях изменения окружающей среды, с помощью второй –дифференцировка клеток и белковый состав тканей и органов.

Кроме того, для клеток эукариот характерна амплификация генов и их перестройка. Оба механизма обеспечивают резкое увеличение копий тех или иных белков, необ­ходимых для реализации клеточного метаболизма.

Известно, что в клетках эукариот ДНК, соединенная с белками (гистонами), упакована в нуклеосомы. В этом состоянии транскрипция невоз­можна, и для экспрессии генов необходимо деблокирование транскриптона. Одним из возможных путей активирования транскриптона является процесс фосфорилирования гистонов. В результате действия белковых гормонов происходит опосредованное фосфорилирование ядерных белков (гистонов) и разрушение нуклеосом. Матрица при этом становится доступной для основ­ных факторов инициации транскрипции, и начинается синтез РНК. При пре­кращении действия гормонов нуклеосомы восстанавливаются.

Ацетилирование и деацетилирование гистонов еще один из факторов ре­гуляции генной активности. В результате ацетилирования положительный заряд белка уменьшается, и сродство гистона к отрица­тельно заряженной ДНК снижается. Это может привести к разрушению нуклеосом и деблокированию транскриптона. Деацетилирование гистонов приводит к противоположному эффекту.

Скорость синтеза белка напрямую зависит от количества мРНК, которое определяется временем ее «полужизни» или стабильностью in vivo.

Лимитирующей стадией процесса трансляции является ее инициация. Регуляция синтеза белка осуществляется также на стадии процессинга белка. Модификации новосинтезированных полипептидов осуществляются при помощи соответствующих ферментов, активность которых, в свою оче­редь, находится под генетическим контролем.

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ

1. Как называется процесс биосинтеза ДНК? Дайте краткую характеристику данного процесса.

2. Как называется процесс биосинтеза РНК? Дайте краткую характеристику данного процесса.

3. Дайте поределение интронам, экзонам, сплайсингу.

4. Как называется процесс биосинтеза белка? Дайте краткую характеристику данного процесса.

5. Что такое генетический код? Перечислите его свойства.

6. Перечислите основные уровни регуляции биосинтеза белка. Дайте им краткую характеристику, приведите примеры.

РНК и белка для удобства описания поделены на три стадии: инициацию, элонгацию и терминацию. Эти этапы описывают неодинаковые механизмы для разных синтезируемых молекул, однако всегда означают начало, ход процесса и завершение. Репликационная терминация представляет собой окончание синтеза молекул ДНК.

Биологическая роль терминации

Инициация и терминация представляют собой начальную и конечную границы наращивания синтезируемой цепи, которое осуществляется на стадии элонгации. Завершение процесса обычно происходит там, где заканчивается биологическая целесообразность дальнейшего синтеза (например, в месте окончания репликона или транскриптона). При этом терминация выполняет 2 важных функции:

• не позволяет синтезу выйти за пределы конкретного участка матричной цепи;
• освобождает продукт биосинтеза.

Так, например, в процессе транскрипции (синтезе РНК на основе ДНК-матрицы) терминация не позволяет процессу пересечь границу конкретного гена или оперона. В противном случае смысловое содержание было бы нарушено. В случае синтеза ДНК терминация удерживает процесс в пределах одного репликона.

Итак, терминация — это один из механизмов поддержания обособленности и упорядоченности биосинтеза различных участков матричных молекул. Кроме того, освобождение продукта позволяет последнему выполнить свои функции, а также возвращает систему в исходное состояние (отсоединение ферментных комплексов, восстановление пространственной структуры матрицы и т. д.).

Что такое терминация синтеза ДНК

Синтез ДНК происходит во время репликации — процесса удвоения генетического материала в клетке. При этом исходная ДНК расплетается, и каждая из ее цепей служит матрицей для новой (дочерней). В результате на месте одной двуцепочечной спирали формируются две полноценные молекулы ДНК. Терминация (окончание) этого процесса у прокариот и эукариот происходит по-разному из-за некоторых отличий в механизмах репликации хромосом и нуклеоида безъядерных клеток.

Как осуществляется репликация

В репликации участвует целый комплекс белков. Главную функцию выполняет фермент, осуществляющий синтез, — ДНК-полимераза, которая катализирует образование фосфодиэфирных связей между нуклеотидами наращиваемой цепи (последние подбираются по принципу комплементарности). Для начала работы ДНК-полимеразе требуется затравка — праймер, который синтезируется ДНК-праймазой.

Этому событию предшествует расплетание ДНК и разделение ее цепей, каждая из которых служит матрицей для синтеза. Так как последний может происходить только от 5`к 3`-концу, одна цепь становится ведущей (синтез происходит в прямом направлении и непрерывно), а другая — отстающей (процесс осуществляется в обратном направлении и фрагментарно). Разрыв между фрагментами впоследствии устраняется ДНК-лигазой.

Расплетание двойной спирали осуществляется ферментом ДНК-хеликазой. В ходе этого процесса образуется Y-образная структура, названная репликационной вилкой. Образующиеся одноцепочечные участки стабилизируются так называемыми SSB-белками.

Терминация — это остановка синтеза ДНК, которая происходит либо в результате встречи репликационных вилок, либо при достижении конца хромосомы.

Механизм терминации у прокариот

Завершение репликации у прокариот происходит в соответствующей точке генома (сайте терминации) и обуславливается двумя факторами:

• встречей репликационных вилок;
• ter-сайтами.

Встреча вилок происходит в том случае, если молекула ДНК имеет замкнутую кольцевую форму, которая характерна для большинства прокариот. В результате непрерывного синтеза происходит соединение 3` и 5` -концов каждой цепи. При однонаправленной репликации точка совмещения совпадает с сайтом инициации (OriC). В таком случае,синтезируемая цепь как бы огибает кольцевую молекулу, возвращаясь к исходной точке и встречаясь с 5`-концом самой себя. При двунаправленной репликации (синтез идет одновременно в двух направлениях от точки OriC) встреча вилок и соединение концов происходит в середине кольцевой молекулы.

Сцепление колец осуществляет ДНК-лигазой. При это формируется структура, называемая катеканом. Путем внесения одноцепочечного разрыва ДНК-гираза разъединяет кольца, и процесс репликации завершается.

В репликации также принимают участие ter-сайты. Они расположены на 100 нуклеотидных пар дальше точки встречи вилок. Эти участки содержат короткую последовательность (23 н.п), с которой связывается белковый продукт гена tus, блокирующий дальнейшее продвижение репликационной вилки.

Терминация репликации в эукариотической клетке

И последний момент. У эукариот одна хромосома содержит несколько точек инициации репликации, а терминация происходит в двух случаях:

• при столкновении вилок, движущихся в противоположных направлениях;
• в случае достижения конца хромосомы.

По окончании процесса разделенные молекулы ДНК связываются с хромосомными белками и упорядоченно распределяются по дочерним клеткам.